إعادة تركيب تيفي بروتياز (علامة له) لتنقية البروتين

نموذج رقم.
G3409-5000U
عادة تسمية
المواد الكيميائية غرامة
تطبيق
صناعة, البحث العلمي
عقارات
وانزيم الإنزيم
التخزين
20 درجة مئوية
فترة الصلاحية
12 شهرًا
متوسط
مجموعة واحدة
استخدام التفاصيل
تنقية البروتين
حزمة النقل
Carton
تخصيص
5000U
العلامة التجارية
Servicebio
الأصل
China
السعر المرجعي
$ 12,420.00 - 13,500.00
اتصل بنا

وصف المنتجات

إعادة تركيب تيفي بروتياز (علامة له)
معلومات حول المنتج
اسم المنتج الفئة لا المواصفات
إعادة تركيب تيفي بروتياز (علامة له) G3409-5000U 5000U

مقدمة عن المنتج
بروتياز تيزي تيفي ريمبيان ريكومينانت هو بروتين يعبر البروتياز السيستين من فيروس إيتتش تبغ (TEV) مع العلامة في إشريكيا كولي. تيفي بروتياز هو بروتياز يستخدم عادة في السيستين، والذي يمكن أن يتعرف بشكل خاص على تسلسل هيبتابتيد Glu-ASN-Leu-Tyr-Phe-Gle-GLY/Ser (E-N-L-Y-F-Q-G/S)، وأداء عملية هضم الإنزيم بين Gln(Q) وGLY/Samer (حمض). تبلغ درجة حرارة الهضم المثالية لتيفيراز البروتياز معاد التركيب 30 درجة مئوية ، والنشاط الإنزيمي لتيفيزي معاد التركيب مرتفع في نطاق 29-34 درجة مئوية . ومع ذلك، عندما تصل درجة الحرارة إلى 37 درجة مئوية أو تتجاوز ذلك ، فإن النشاط الإنزيمي لتيفيزي معاد التركيب ينخفض بشدة. في العملية الفعلية، للحفاظ على بنية البروتين المستهدف ونشاطه البيولوجي قدر الإمكان، يوصى باستخدام هضم إنزيم بروتياز TEV ليلاً عند درجة حرارة 4 درجات مئوية . إن البروتياز الذي يعمل في إعادة التركيب TEV نشط في نطاق الرقم الهيدروجيني (pH) من 6.0 إلى 9.0، ولكنه يفقد نشاط الإنزيم عندما يكون الرقم الهيدروجيني (pH) أقل من أو يساوي 5.لا يزال البروتياز TEV لديه نشاط مرتفع في إيميدازول 400 مم. لذلك، من أجل تنقية البروتين المستهدف الذي يحتوي على ملصمته بواسطة عمود النيكل، يمكن إضافة تيفي بروتياز مباشرة إلى محلول البروتين المستهدف الذي تم تنقيته والذي يحتوي على تركيز مرتفع من إيميدازول. عند درجة حرارة 4 مئوية ، تتم إزالة الأمعدوزول بواسطة الغسيل الكلوي ويتم إجراء عملية الهضم الإنزيمي في الوقت نفسه. كما يمكن إزالة الملصق الخاص به عن طريق الهضم الإنزيمي مع تيفي بروتياز بعد الغسيل الكلوي. يمكن إزالة البروتياز الخاص بتيفي مع العلامة في محلول البروتين الهدف بعد هضم الإنزيم وتزينه العلامة الخاصة به عن طريق ربط عمود النيكل.
التطبيق: يستخدم عادة لإزالة MBP، GST، أو بروتينات أخرى معلّمة من بروتينات الانصهار. يحتوي تيفي بروتياز على الملصق الخاص به ويمكن ربطه بعمود النيكل.
المصدر: فيروس إيتش (TEV) مادة البروتياز في السيستين، تعبير إيثريكيا كولي مشبع على الملصق.
تعريف نشاط الإنزيم: عند 30 درجة مئوية ، وpH8.0، و3ميكرو غرام من الركيزة (تحتوي على موقع انفصال البروتياز من TEV معاد التركيب) يمكن تمزينه في غضون ساعة واحدة أكثر من 85% من وحدة نشاط الإنزيم المطلوبة.
عدم التنشيط أو التثبيط: لا تمنع مثبطات البروتياز الشائعة مثل PMSF و AEBSF و Bestatin و Pepstatin و EDTA نشاط البروتياز الخاص بـ TEV. مثبطات البروتياز التي تستهدف مخلفات السيستين، مثل NEM أو IAA، يمكن أن تمنع بشكل كبير نشاط بروتياز TEV. ولا يزال تيفي بروتياز يحافظ على نشاط إنزيم أعلى في تركيز أعلى من إيميدازول.
النقاء والتركيز: درجة نقاوة اختبار SDS الصفحة ≥95%، 10 U/ميكرو لتر.
محلول تخزين البروتياز من TEV معاد التركيب: 50 مم ثلاثي هيدروكلوريد (ثلاثي كلور حلقي الهكسان - حمض نووي)، 250 مم نحاسي (NaCl)، 1 مم EDTA، 5 مم ثلاثي تيكتر (DTT)، 50% (v/v) جليسرول، الرقم الهيدروجيني (pH)  8.0 .
مخفف 10×TEV: 500 مم ثلاثي هيدروكسيل، 500 مم ناكل، 5 مم EDTA، 10 مم دتكت، الرقم الهيدروجيني (pH)  8.0 .

التخزين والنقل
يمكن تخزينها على درجة حرارة 20 درجة مئوية، صالحة لمدة 12 شهرًا.

خاص
رقم المكون المكون G3409-5000U
G3409-1 ريمبيريز تيفي (علامة له) معاد التركيب (10 U/مايكرولتر) 500 ميكرو لتر
G3409-2 مخفف TEV 10×10 3×1 مل
G3409-3 التحكم بالبروتين 100 ميكرو لتر
يدوي 1

خطوات التشغيل:
1.توصيات نظام الهضم إلى Portenase
المكون مستوى الصوت
مخفف TEV 10×10 5 ميكرو لتر
بروتين الاهتمام 30 ميكروغرام
ريمبيريز تيفي (علامة له) معاد التركيب (10 U/مايكرولتر) 1 ميكرو لتر
إلH2O إلى 50 ميكرو لتر
2)   وضع نظام رد الفعل عند درجة حرارة 30 درجة مئوية  في درجة حرارة 1-4H. إذا لم يكن البروتين المستهدف مستقرًا عند 30 درجة مئوية ، فيمكن وضع نظام التفاعل عند 4 درجات مئوية  ليلاً للهضم الإنزيمي (حوالي 16 ساعة).
3) تم إجراء فحص على صفحة SDS على عينة من منتج الهضم سعة 10 ميكرولتر لتقييم جرعة الهضم وظروف التفاعل

ملاحظات:
1)  ينبغي وضع منتجات الإنزيمات في صندوق ثلج أو حوض ثلج، وتخزينها في -20 درجة مئوية  بعد الاستخدام مباشرة. يوصى باستخدام وحدة تخزين منفصلة.
2. لضمان سلامتك وصحتك، يُرجى ارتداء معطف المختبر والقفازات التي تستعمل لمرة واحدة للعمل.
Recombinant Tev Protease (His-tag) for Protein Purification الشكل 1: تأثيرات بروتين الاندماج A+B الذي يحتوي على الهضم الإنزيمي موقع البروتياز التائي التائي معاد التركيب (حالة الهضم 30 درجة مئوية ، درجة الحموضة 8.0، الهضم الإنزيمي لمدة 0 دقيقة، 10 دقائق، 20 دقيقة، 30 دقيقة، 1 ساعة، 2H، على التوالي، مقابل لين لين لين: 1-6، نسبة كتلة الركيزة إلى الإنزيم المضافة في نظام الهضم كانت 20:1).

Recombinant Tev Protease (His-tag) for Protein Purification Recombinant Tev Protease (His-tag) for Protein Purification Recombinant Tev Protease (His-tag) for Protein Purification Recombinant Tev Protease (His-tag) for Protein Purification
 

 

الكاشف الكيميائي

GIFTARGETINC.COM, 2023